寡核苷酸,一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段,但在使用這一術(shù)語時(shí),對核苷酸殘基的數(shù)目并無嚴(yán)格規(guī)定,在不少文獻(xiàn)中,把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成,它可作為DNA合成的引物、基因探針等,在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中具有廣泛的用途。
合成概述:
寡核苷酸合成是可通過較大生物分子的斷裂或者通過靶向化學(xué)合成以酶促方式形成。在后一種情況下,有機(jī)核苷酸合成是化學(xué)過程,通過該過程合成核苷亞磷酰胺。核苷亞磷酰胺本身是天然或合成核苷的衍生物。
因此,核苷酸是由共價(jià)連接的核苷和磷酸基團(tuán)組成的復(fù)合分子。 核苷酸以特異性序列連接以形成所需產(chǎn)物。因此,寡核苷酸由連接在一起形成單鏈生物聚合物的核酸短片段組成。由于大多數(shù)寡核苷酸通常由多達(dá)20個(gè)連接的核苷酸組成,因此可以將其視為小生物制藥分子。
與其他同藥物相關(guān)的小分子非常相似,寡核苷酸合成需要對溫度、pH、底物質(zhì)量等因素進(jìn)行嚴(yán)格控制。由于寡核苷酸合成采用典型方法,因此核苷酸序列越長且越復(fù)雜,則越難以滿足產(chǎn)量、純度和成本目標(biāo)。過程分析技術(shù)對于實(shí)現(xiàn)這些目標(biāo)很有用。
應(yīng)用:
本產(chǎn)品常用來作為探針確定DNA或RNA的結(jié)構(gòu),用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中。
寡核苷酸合成的DNA可以用于鏈聚合反應(yīng),能放大確定幾乎所有DNA的片段,在這個(gè)過程中寡核苷酸是作為引物,和DNA中標(biāo)記的互補(bǔ)片段結(jié)合,作成DNA的復(fù)制品。
調(diào)控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止其翻譯成蛋白,在制止癌細(xì)胞活動方面能起一定的作用。